DCS细胞中SRS19-6白血病病毒3’-cDNA序列的克隆
@@利用本室建立的树突状细胞肉瘤(dendritic cell sarcoma,DCS)细胞系免疫Lou/c大鼠,制 备了细胞膜蛋白单克隆抗体983D4,该抗体具有小鼠肿瘤细胞的特异性,能抑制体外细胞生 长 速度,降低克隆形成能力[1]。为了得到其cDNA序列,本工作构建了DCS细胞cDNA表 达文库并用983D4单抗进行了免疫学筛选。
1 材料与方法
1.1 细胞总RNA的提取及cDNA合成 用异硫氰酸胍-酚-氯仿抽提一步法 [2]提取DCS细胞总RNA,oligo-dT纤维素层析柱(Gibco-BRL)分离mRNA后,按照Gibc o-BRL公司逆转录试剂操作说明,分别用MMLV逆转录酶和E.coli DNA聚合酶I作用下合成cD NA第一、二链,Sephacryl S-400离心柱除去小分子cDNA。
树突状细胞肉瘤、白血病病毒、逆转录酶、克隆形成能力、异硫氰酸胍、单克隆抗体、肿瘤细胞、体外细胞、提取、免疫学、合成、操作说明、胞膜蛋白、一步法、小分子、纤维素、细胞系、特异性、聚合酶、层析柱
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R371-33;Q781(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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