人白细胞介素4在大肠杆菌中的优化表达
目的:通过优化设计利用大肠杆菌表达人白细胞介素4(IL-4)并提高其表达量.方法:根据原核翻译起始序列的局部二级结构自由能,设计了AUG上下游序列,并在人IL-4基因下游插入部分大肠杆菌LacZ序列以提高mRNA的稳定性.结果:成功地构建了人IL-4的高效表达克隆,命名为pLCM182-hIL4.SDS-PAGE分析显示所表达的重组IL-4蛋白质占细菌总蛋白的30%.目的基因下游没有插入LacZ序列所构建的表达克隆pCZH-hIL4在大肠杆菌中的表达量则占细菌总蛋白的20%左右.结论:所设计的优化表达方法对人IL-4基因的表达是成功的,在细胞因子的工程化表达中,优化设计对基因的表达量至关重要.
人白细胞介素4、基因表达、大肠杆菌、优化表达
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R392.11
国家科技攻关项目BH-03-01-03
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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405-407