马铃薯六种主要病毒通用RT-PCR检测体系的建立

摘要：

马铃薯X病毒（PVX）、马铃薯Y病毒（PVY）、马铃薯S病毒（PVS）、马铃薯卷叶病毒（PLRV）、马铃薯M病毒（PVM）和马铃薯A病毒（PVA）是马铃薯生产田中发生率较高、危害较严重的病毒，因此，建立特异性强、灵敏度高、检测速度快的RT-PCR分子检测体系对保障马铃薯种薯质量具有非常重要的意义。试验筛选了6种病毒的特异引物、优化了PCR部分的试剂以及确定了退火温度。结果表明，当Mg2+浓度为2.6 mmol/L、dNTPs浓度为0.1 mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度为0.03 U/μL，以及退火温度为55.5℃时反应体系最稳定。最终，建立了一套通用RT-PCR检测体系，只需要变换每种病毒的引物，就可以实现对PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM和PVA病毒的RT-PCR检测。每种病毒检测灵敏度均能达到pg以上。

关键词：马铃薯、PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM、PVA

分类号：S532(薯类作物)

资助基金：黑龙江省自然科学基金项目C201234；黑龙江省农业科技创新工程重点资助项目2012ZD015；现代农业产业技术体系专项资金资助CARS-10-P14；国家科技支撑项目2012BAD06B02-02C2。

在线出版日期：2015-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：222-227