百草枯诱导的SH-SY5Y细胞中核连蛋白2基因的表达变化

摘要：

目的 检测核连蛋白(NUCB)2在百草枯(PQ)诱导的SH-SY5Y细胞中的表达变化,分析NUCB2在PQ引起的SH-SY5Y细胞凋亡中的作用机制.方法 采用MTT法进行SH-SY5Y细胞毒性分析.选择PQ作用的最佳浓度和时间点,进一步收取经PQ处理后的SH-SY5Y总RNA,首先采用RT-PCR方法观察NUCB2的表达趋势,然后采用real-time PCR方法进行NUCB2基因进行表达变化检测,采用ΔΔCt法进行定量比较分析.结果 MTT方法在酶标仪490 nm波长下,分析得到PQ的最佳作用浓度和时间是0.5 mmol/L作用24 h,此时细胞活力较对照组低约41.67%;采用ΔΔCt法进行定量比较分析,发现NUCB2在mRNA水平的表达量明显降低(P=0.001 6);Western印迹检测发现SH-SY5Y细胞经PQ诱导后引起了caspase-3酶原形式的表达量降低(P<0.05).结论 NUCB2基因在经PQ诱导后的SH-SY5Y细胞中表达量明显降低,分析其可能在神经细胞的凋亡机制中发挥重要作用.

关键词：核连蛋白(NUCB)2、PQ、SH-SY5Y、凋亡

所属期刊栏目：37

分类号：R285(中药学)

资助基金：河北省教育厅青年指导项目Z2017027

在线出版日期：2017-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：3158-3160