达格列净通过p38丝裂原活化蛋白激酶抑制高糖诱导的人肾小球足细胞损伤

摘要：

目的 探讨达格列净通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路对D-葡萄糖诱导的人肾小球足细胞凋亡、自噬、炎症反应及氧化损伤的影响.方法 体外培养人肾小球足细胞(HGPCs),分为对照组(5 mmol/L D-葡萄糖)、D-葡萄糖组(30 mmol/L D-葡萄糖)、达格列净组(30 mmol/L D-葡萄糖+50 μmol/L 达格列净)、抑制剂组(30 mmol/L D-葡萄糖+10 μmol/L p38 MAPK通路抑制剂SB 203580)、达格列净+抑制剂组(30 mmol/L D-葡萄糖+50 μmol/L 达格列净+10 μmol/L SB 203580)和达格列净+激活剂组(30 mmol/L D-葡萄糖+50 μmol/L 达格列净+10 μmol/L p38 MAPK通路激活剂C16-PAF).对照组与D-葡萄糖组用D-葡萄糖干预 24 h;其他组D-葡萄糖干预 24 h后相应药物继续干预24 h.采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力;采用Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡率;采用ELISA检测白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醇(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达水平;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测酵母ATG6同源物(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ(LC3 Ⅱ)mRNA表达水平;采用Western印迹法检测Beclin-1、LC3 Ⅱ、p53、p38 MAPK及p-p38 MAPK蛋白表达.结果 与对照组相比,D-葡萄糖组细胞活力降低(P＜0.05),达格列净组细胞活力升高(P＜0.05),细胞凋亡率,IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Beclin-1、LC3 ⅡmRNA和蛋白、p53 和p-p38 MAPK蛋白水平升高(P＜0.05),SOD水平降低(P＜0.05).与D-葡萄糖组相比,达格列净组和抑制剂组细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Beclin-1、LC3 ⅡmRNA和蛋白、p53 和p-p38 MAPK蛋白水平降低(P＜0.05),SOD水平升高(P＜0.05).与达格列净组相比,达格列净+抑制剂组细胞凋亡率、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、Beclin-1、LC3 Ⅱ mRNA和蛋白、p53 和p-p38 MAPK蛋白水平进一步降低(P＜0.05),SOD水平进一步升高(P＜0.05);达格列净+激活剂组与达格列净+抑制剂组变化趋势相反,与达格列净组差异有统计学意义(P＜0.05).结论 达格列净可抑制高糖诱导的人HGPCs的凋亡、自噬、炎症反应及氧化损伤,其作用机制可能与抑制p38 MAPK通路信号转导相关.

关键词：糖尿病肾病、足细胞、达格列净、p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路

所属期刊栏目：30

分类号：R692(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)

在线出版日期：2023-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：683-690