过表达锌指蛋白A20可抑制肺泡巨噬细胞炎症反应

摘要：

目的：通过建立A20过表达肺泡巨噬细胞株，研究A20对肺泡巨噬细胞炎症反应的影响及调控机制。方法：构建携带A20基因的慢病毒载体，转染大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383），筛选出稳定过表达A20基因的细胞株并行体外培养。向培养基中加入脂多糖（LPS ，1μg／mL）进行干预，并于刺激后0．5、1、2、4 h收集上清液及细胞。ELISA法测定上清液中细胞因子（TNF‐α、IL‐1β）及核因子κB（NF‐κB）活性。Western印迹方法检测A20蛋白及核内p65含量。实时荧光定量PCR法测定A20 mRNA含量。结果：LPS刺激后，A20过表达组（A20组）及正常对照组（VEC组）A20蛋白及mRNA含量都升高，并于1 h达高峰，之后逐渐下降；且A20组较 VEC组 A20水平明显升高（P＜0．05）。与 VEC组相比，A20组培养上清液中细胞因子（TNF‐α、IL‐1β）水平明显降低（P＜0．05）；NF‐κB DNA结合活性及核内p65含量也降低（P＜0．05）。结论：A20能够抑制肺泡巨噬细胞NF‐κB活性及TNF‐α、IL‐1β分泌，进而抑制肺泡巨噬细胞炎症反应活性。

关键词：急性呼吸窘迫综合征、A20蛋白、肺泡、巨噬细胞、炎症反应

所属期刊栏目：23

分类号：R563.8(呼吸系及胸部疾病)

资助基金：国家自然科学基金青年基金81300055，81500025;国家自然科学基金重点项目30930090．Supported by National Natural Science Youth Foundation of China81300055，81500025;Key Project of National Natural Science Foundation of China 30930090．

在线出版日期：2017-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：715-719