重组exendin-4类似物EW的制备及其体内降糖活性分析

摘要：

目的:探讨重组exendin-4类似物EW的基因工程制备方法及纯化后的体内降糖活性.方法:设计引物并以PCR法扩增EW基因,其N-端具有胰蛋白酶的酶切位点,C-端具有终止密码子,通过串联的方式在大肠杆菌JM109中高效表达.包涵体纯化后,通过胰蛋白酶对融合蛋白进行酶解,继而纯化,获得重组EW.测定腹腔内注射EW、exendin-4及0.9％氯化钠溶液后C57BL/6小鼠体内血糖情况.结果:将串联8个EW拷贝后的8EW基因在大肠杆菌中表达,获得的包涵体经过增溶保护后以胰蛋白酶酶切获得EW,重组EW的收率为200～250 mg/L发酵液.纯化冷冻干燥后的EW在C57BL/6小鼠体内降糖活性与exendin-4相当.结论:基因工程制备的EW是一种很有前景的抗糖尿病药物.

关键词：exendin-4类似物、EW、表达、纯化、降糖活性

所属期刊栏目：20

分类号：R587.1(内分泌腺疾病及代谢病)

资助基金：上海市科委重点项目10431904000

在线出版日期：2013-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：263-266