一种高效的小鼠胰岛分离纯化新技术

摘要：

目的:探讨获得足够数量和较高纯度小鼠胰岛的分离及纯化方法,为进行小鼠的胰岛移植提供实验条件.方法:将6～8周,体质量25～30 g的雄性C57BL/6 小鼠腹腔麻醉后结扎胆总管,采用胶原酶Ⅴ逆行灌注、原位消化、Ficoll-400梯度离心并用无菌的毛细吸管在相差显微镜下观察并分选胰岛,双硫腙(DTZ)染色鉴定胰岛细胞.体外培养胰岛单细胞,并于第3、8、24天观察胰岛形态.结果:采用该法分离纯化后,每只小鼠可得到390±20个胰岛,胰岛呈圆形或团块状,直径50～150 μm,形态完整,折光性好,纯度达85%以上,24 d后在培养皿内铺成单个细胞.结论:本研究所用逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心分离、纯化胰岛细胞的方法省时、高效,培养的胰岛细胞活性好,适合进一步研究的需要.

关键词：胰岛、分离、纯化、培养

所属期刊栏目：18

分类号：R666

资助基金：复旦大学重点学科优秀博士生科研资助计划

在线出版日期：2011-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：145-146,149