小鼠Atrogin-1基因真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达

摘要：

目的:构建小鼠Atrogin-1基因真核表达载体,研究其功能,并探讨其在癌性恶液质骨骼肌萎缩中的作用机制.方法:提取小鼠C2C12细胞RNA,反转成cDNA,PCR合成含有酶切位点的Atrogin-1 cDNA全长,酶切后连接到真核表达载体pcDNA3.1, 构建重组真核表达载体pcDNA3.1-Atrogin-1, 经鉴定及测序证实cDNA片段大小和序列正确,然后用其转染293T细胞,Western blot法检测Atrogin-1蛋白的表达.结果:pcDNA 3.1-Atrogin-1含大小、序列正确的Atrogin-1cDNA片段,转染pcDNA3.1-Atrogin-1的293T细胞裂解液中能检测到Atrogin-1蛋白高表达.结论:成功构建了Atrogin-1基因真核表达载体pcDNA 3.1-Atrogin-1,并在真核细胞中表达了目的蛋白,其是研究癌性恶液质的重要工具.

关键词：Atrogin-1、真核表达载体、癌性恶液质

所属期刊栏目：16

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30571819

在线出版日期：2009-12-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：662-664