天麻素抑制H2O2诱导的PC12细胞铁死亡

摘要：

目的:研究天麻素对过氧化氢(H2 O2)损伤的PC12细胞的保护作用及机制.方法:建立H2 O2损伤PC12细胞神经损伤模型.MTT法检测细胞活力并确定H2 O2最佳造模浓度,筛选和确定天麻素最佳处理浓度.试剂盒检测丙二醛(MDA)、总谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)水平和活力变化;流式细胞仪检测细胞脂质活性氧(ROS)水平;透射电子显微镜观察PC12细胞形态变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p53、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达变化.结果:MTT法实验结果显示,50μmol/L H2 O2处理PC12细胞48 h,细胞生长抑制率接近50％;而天麻素(1、5、25μmol/L)预处理4 h可提高H2 O2损伤细胞的存活率,且其作用呈浓度依赖性.MDA、GSH、SOD检测结果表明天麻素降低H2 O2处理后的MDA水平,并提高SOD和GSH活力.流式细胞仪检测发现,H2 O2损伤后细胞内ROS的含量升高,而天麻素预处理后有效降低H2 O2损伤的细胞内ROS的含量.透射电子显微镜观察结果显示,与正常组相比,50μmol/L H2 O2处理后PC12细胞的线粒体脊变厚,线粒体体积变小;天麻素预保护处理后,PC12细胞的线粒体形态趋于正常状态.Western blot结果表明,天麻素预保护后可升高H2 O2损伤后GPX4蛋白表达水平,并降低p53蛋白表达水平.结论:H2 O2可通过增加PC12细胞内氧化应激水平引起铁死亡;天麻素预保护后可上调细胞内GPX4蛋白表达和下调p53蛋白表达,从而减少细胞氧化应激产生,抑制细胞铁死亡发生而发挥保护PC12细胞的作用.

关键词：天麻素、铁死亡、H2O2、氧化应激、神经退行性疾病

所属期刊栏目：26

分类号：R965.2(药理学)

资助基金：浙江省重点建设高校优势特色学科中药学开放基金项目ZYAOXZD2019007

在线出版日期：2021-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：532-538