白藜芦醇抑制大肠埃希菌O104:H4诱导的结肠上皮细胞NLRP3炎症小体活化

摘要：

目的:研究白藜芦醇(RES)对大肠埃希菌O104:H4感染的结肠上皮Caco-2细胞线粒体和氧化应激损伤及NLRP3炎症小体活化的影响.方法:RES(200μmol/L)预处理Caco-2细胞12 h,然后107 CFU/mL的大肠埃希菌O104:H4(MOI 10:1)感染细胞4 h.CCK-8法检测细胞活力,qRT-PCR法分析过氧化物酶体增殖物激活受体γ 共激活因子1α(PGC1α)、细胞色素氧化酶4(COX-4)、核呼吸因子1(NRF1)、线粒体转录因子1(TFAM)、超氧化物歧化酶1(SOD1)和血红素加氧酶1(HO-1)mRNA表达水平,Western blot检测炎症小体NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1活化亚基p20(CASP1 p20)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1活化亚基p10(CASP1 p10)、pro-IL-1β和IL-1β蛋白表达水平,并对Caco-2细胞线粒体膜电位、氧耗量和活性氧(ROS)水平进行检测.结果:大肠埃希菌O104:H4感染可明显诱导NLRP3、CASP1 p20、CASP1 p10、IL-1β 蛋白和PGC1α、COX-4和NRF1 mRNA表达,促使氧消耗量和ROS水平增高,而细胞活力、TFAM mRNA表达和线粒体膜电位降低(P<0.05);RES处理后能明显抑制NLRP3、CASP1 p20、CASP1 p10、IL-1β蛋白和PGC1α、COX-4和NRF1 mRNA表达,降低氧消耗量和ROS水平,而细胞活力、TFAM mRNA表达和线粒体膜电位增高(P<0.05);另外,ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)也能显著抑制NLRP3炎症小体和IL-1β表达水平.结论:大肠埃希菌O104:H4感染诱导Ca-co-2细胞线粒体释放ROS和NLRP3炎症小体活化,而RES可部分改善Caco-2细胞损伤,降低NL-RP3炎症小体和ROS水平.

关键词：白藜芦醇、大肠埃希菌O104∶H4、结肠上皮细胞、NLRP3炎症小体

所属期刊栏目：26

分类号：R965.2(药理学)

资助基金：湖北省卫生健康委员会 ZY2019Q021

在线出版日期：2021-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：167-173