脂质体VEGFR2胞外区基因肿瘤疫苗的制备及其免疫激活体外抗肿瘤活性研究

摘要：

目的:制备脂质体(LP)携带VEGFR2胞外区(exVEGFR2)肿瘤抗原pCMV质粒复合物基因疫苗,为肿瘤免疫治疗提供新的主动免疫疗法.方法:RT-PCR扩增含2个KpnⅠ和XbaⅠ限制性酶切位点的exVEGFR2序列,将其与pCMV质粒连接,构建pCMV/exVEGFR2质粒.Western blot检测exVEGFR2体外表达水平.用制备好的脂质体pCMV/exVEGFR2复合物(LP-pCMV/exVEGFR2)免疫C57BL/6小鼠,ELISA法检测其免疫激活活性.利用51 Cr释放实验分析CTLs介导的细胞毒活性.结果:成功扩增到exVEGFR2序列,并构建pCMV/exVEGFR2质粒;只有在pCMV/exVEGFR2转染COS-7细胞中,检测到与目的蛋白序列大小一致的相对分子质量为90000的VEGFR2特异性条带.LP-pCMV/exVEGFR2免疫小鼠6周后,ELISA法检测到强烈的特异性抗VEGFR2免疫激活效应;其免疫T细胞能够有效地介导体外VEGFR2阳性的CT-26结肠癌细胞毒性.结论:LP-pCMV/exVEGFR2能够有效地激活小鼠产生特异性抗VEGFR2免疫应答效应,并产生体外抗肿瘤细胞免疫毒性,为后期研究主动免疫治疗VEGFR2阳性肿瘤奠定实验基础.

关键词：VEGFR2、脂质体、pCMV质粒、疫苗

所属期刊栏目：26

分类号：R965.2(药理学)

资助基金：台州市科技基金 ;浙江省卫生厅科研基金

在线出版日期：2021-02-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：24-29