中药胡椒碱在终板软骨细胞退变中的保护作用的研究
目的:探讨中药胡椒碱对椎间盘终板软骨细胞退变的保护作用.方法:分离获取大鼠终板软骨细胞,体外培养建立终板软骨细胞加力退变模型.设空白对照组(未加力细胞)、加力组(10％间歇性循环牵张力,10％ ICMT,0.5 Hz,8h/d,加力3d)及加力加药物组(加力组中加入中药胡椒碱40 μmoL/L).倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,甲苯胺蓝染色鉴定细胞表型.实时聚合酶链反应检测各组细胞中SOX-9基因,Ⅱ型胶原,蛋白聚糖,MMP13的表达情况,核质分离及免疫印迹检测胞核与胞质中NF-κB信号通路相关蛋白P65、p-P65表达变化.结果:细胞体外加力后表型丢失,甲苯胺蓝染色可见细胞外基质减少,加力加药组细胞外基质未见明显减少.加力组细胞(ICMT)较空白对照组细胞(NC组)SOX-9(ICMT/NC=0.22,P＜0.01)、蛋白聚糖(ICMT/NC =0.15,P＜0.01)、Ⅱ型胶原(ICMT/NC=0.18,P＜0.01)表达明显降低,NF-κB信号通路相关基因P65入核增加,NF-κB信号通路相关基因MMP13 (ICMT/NC=1.68,P＜0.05)表达明显上升.40 μmol/L胡椒碱处理的加力加药组较加力组细胞核内p-P65减少,NF-κB信号通路相关基因MMP13(40 μmol/L胡椒碱/ ICMT=0.70,P＜0.05)表达降低,40μmol/L胡椒碱处理的加药加力组中Ⅱ型胶原(40 μmol/L胡椒碱/ICMT=1.93,P＜0.05)、蛋白聚糖(40 μmol/L胡椒碱/ICMT=1.78,P＜0.05)、SOX-9(40 μmol/L胡椒碱/ICMT=1.70,P＜0.05)等基因表达明显回升.结论:中药胡椒碱可以抑制椎间盘终板软骨细胞的退变发生,从而起到对椎间盘及终板软骨的保护作用.
胡椒碱、终板软骨细胞、间歇性循环牵张力、NF-κB信号通路、基质金属蛋白酶13
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R965.2(药理学)
国家自然科学基金81272048、30973025、81311130314;卫生部公益性行业专项基金201002018
2016-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
611-616
