三羟基异黄酮通过AMPK和mTOR信号通路对宫颈癌细胞抑制作用的研究
目的:探讨三羟基异黄酮对人宫颈癌Caski细胞株生长凋亡的影响及机制.方法:磺酰罗丹明B(SRB)比色法检测不同浓度三羟基异黄酮(GEN)干预对Hela,SiHa,Caski,HeLa-S3,HeLa229及C-33A等宫颈癌细胞株生长增殖的影响.流式细胞术检测细胞周期和线粒体膜电位变化情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测细胞内一磷酸腺苷(AMP)激活的蛋白激酶(AMPK)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关基因的信使核糖核酸和蛋白水平的表达.免疫沉淀法检测三羟基异黄酮对Caski细胞结节性硬化症基因1/结节性硬化症基因2 (TSC2/TSC1)复合物组装的影响.结果:三羟基异黄酮的抗癌效能次序是Caski＞Hela＞C-33A＞SiHa＞HeLa-S3＞HeLa229;三羟基异黄酮彻底阻滞了Caski细胞周期进程,并诱导其凋亡.三羟基异黄酮没有改变G1调节蛋白的mRNA表达水平,表明蛋白翻译受到抑制,但转录水平没受到影响.三羟基异黄酮诱导组装TSC1/TSC2,并通过抑制包括mTOR(Ser2448)、p70S6K(Thr421/Ser424和Thr389)和4E-BP1(Thr37/ Thr46和Thr70)等蛋白质磷酸化导致细胞蛋白质合成受阻.三羟基异黄酮干预还引起宫颈癌细胞AMPK活性升高.AMPK抑制剂复合物C显著逆转三羟基异黄酮干预效果的结果表明AMPK通路是三羟基异黄酮抑制宫颈癌细胞增殖过程中的关键途径.此外,线粒体膜电势和线粒体含量下降表明三羟基异黄酮引起线粒体氧化应激.结论:三羟基异黄酮干预Caski细胞后,引起线粒体应激反应,激活AMPK信号通路,使线粒体膜电位下降、TSC1/TSC2复合物形成增加及mTOR介导的蛋白质翻译通路受阻,最终导致宫颈癌Caski细胞周期G1期阻滞,并诱导其凋亡.
三羟基异黄酮、宫颈癌、腺苷酸活化蛋白激酶、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、G1期阻滞
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R965.2(药理学)
2014-04-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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