肾气丸对结肠癌LoVo细胞水通道蛋白2表达的调节作用
目的:探讨肾气丸对结肠癌LoVo细胞中水通道蛋白2(Aquaporin2,AQP2)表达的调节作用.方法:将30只正常成年雄性SD大鼠随机分为正常对照组、肾气丸低剂量组(1.5 g/kg)、肾气丸高剂量组(3.0 g/kg),连续给药7d后,心脏取血分离制备含药血清.体外培养LoVo细胞,给予不同浓度肾气丸含药血清作用24 h,采用MTT法检测细胞存活率,间接免疫荧光法结合荧光显微镜观察AQP2在LoVo细胞上的分布,运用Western blot法检测细胞中AQP2的蛋白表达,并通过RT-PCR技术检测AQP2的mRNA水平.结果:与正常大鼠血清相比,50%浓度的肾气丸低剂量含药血清、25%浓度的肾气丸高剂量含药血清均能明显增加AQP2蛋白的表达(P<0.01),其中后者的作用更为显著(P<0.05);此外,二者均能上调LoVo细胞中AQP2 mRNA水平(P<0.05).结论:肾气丸含药血清通过影响LoVo细胞AQP2的基因转录与翻译过程,提高AQP2基因mRNA与蛋白表达水平,提示肾气丸可能作用于水通道蛋白2的调控通路从而起到调节体内的水液代谢的作用.
肾气丸、水通道蛋白2、水液代谢、血清药理学
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R965.2(药理学)
国家自然科学基金资助项目30973921,81173143;高等学校博士学科点专项科研基金资助项目20103322110003
2013-08-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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