胰高血糖素受体拮抗剂筛选模型的建立

摘要：

目的:研究胰高血糖素受体(GR)拮抗剂筛选模型的建立.方法:用离心法提取大鼠肝脏GR,以125I标记的胰高血糖素(125I-Glucagon)为配体,利用放射性配体结合分析法,检测配体与GR的饱和性结合特征及14个化合物的竞争性结合能力.为进一步研究GR拮抗剂的筛选方法,将含有GR目的基因Pmt 5.1 cDNA短暂转染在中国仓鼠卵巢细胞(Chinese hamster ovary cell,CHO)上,加入钙离子敏感性荧光染料(Fluo-3),通过检测荧光强度的改变,筛选GR拮抗剂.结果:竞争结合实验证明125I-Glucagon与GR结合良好,其平衡解离常数kd值为9.38 nmol·L-1,受体最大容量Bmax为4.33nmol·L-1;14个化合物中有4个化合物(ZM102849、ZM102850、ZM102854和ZM102855)与GR结合良好.CHO细胞表达GR后,对4个与GR结合良好的化合物进行细胞水平实验,结果表明化合物ZM102850可以引起荧光强度明显降低,具有拮抗GR的作用.结论:通过放射性配基结合实验方法和荧光强度检测法可以筛选GR拮抗剂.

关键词：放射配基结合、胰高血糖素受体、125I-胰高血糖素、拮抗剂、中国仓鼠卵巢细胞、转染

所属期刊栏目：11

分类号：R965.1(药理学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2004AA234011

在线出版日期：2006-12-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1129-1132