10.3969/j.issn.1009-2501.2004.05.005
大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系检测方法学研究
目的:建立大鼠肝微粒体蛋白含量以及肝微粒体细胞色素P450酶系含量与活性测定的紫外和荧光分光光度方法.方法:应用差速离心法提取大鼠肝微粒体,Lowery法测定肝微粒体蛋白浓度,应用紫外和荧光分光光度法测定肝微粒体细胞色素P450酶系含量及活性.结果:牛血清白蛋白标准曲线的线性范围为25~250 mg·L-1,最低检测限为 25 mg·L-1,相关系数r为 0.9975;紫外分光光度法测定细胞色素P450和细胞色素b5含量及NADPH-CytC还原酶活性的结果显示方法灵敏;测定氨基比林N-脱甲基酶、红霉素N-脱甲基酶活性的甲醛标准曲线,线性范围为 0.05~0.5 mmol·L-1,最低检测限为 0.05 mmol·L-1,相关系数r为 0.9988;测定7-乙氧基香豆素脱烃酶活性的resorufin标准曲线线性范围为1~8 μmol·L-1,最低检测限为 1 μmol·L-1,相关系数r为 0.9998.结论:紫外和荧光分光光度方法测定大鼠肝微粒体细胞色素P450酶系中6种酶的含量及活性的灵敏可靠,重复性较好.
紫外分光光度计、荧光分光光度计、肝微粒体细胞色素P450
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R965.2(药理学)
2004-06-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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