外源性Bax基因过表达对神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞株Smac蛋白表达的影响

摘要：

目的：观察Bcl-2相关X蛋白（Bax）基因过表达对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞第二个线粒体来源的半胱氨酸酶的激活剂（Smac）蛋白表达的影响。方法采用脂质体Lipofectamine 2000将携带人Bax基因的过表达质粒转入SH-SY5Y细胞（转染组），同时设空载体组和未转染组。通过G-418筛选后获得转入目的基因的细胞克隆。Hoechst33258染色观察凋亡细胞，免疫印迹法法检测细胞中Bax、Smac蛋白表达，免疫荧光染色检测Bax、Smac蛋白在细胞中的分布。结果转染后用G-418持续筛选2周可获得G418抗性的细胞克隆。Smac主要分布于胞质，Bax主要位于细胞核。转染组SH-SY5Y细胞Bax蛋白表达水平（1.067±0.036）较空载体组（0.436±0.035）和未转染组（0.444±0.046）显著增高（P<0.05）；转染组Smac蛋白表达水平（1.408±0.044）相比空载体组（0.708±0.021）和未转染组（0.748±0.041）显著增高（P<0.05）；空载体和未转染组细胞Bax和Snac蛋白表达均无显著差异（P>0.05）。转染组较未转染组细胞凋亡率显著增加（P<0.05）。结论外源性Bax基因转入人神经母细胞瘤细胞中并稳定过表达，能够上调Smac蛋白表达，促进细胞凋亡。

关键词：神经母细胞瘤、SH-SY5Y细胞、Bax、Smac、细胞凋亡

分类号：R739.41;Q786(肿瘤学)

在线出版日期：2014-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：535-538