质粒重编程诱导多潜能干细胞及定向分化神经干细胞

摘要：

目的：探讨游离质粒载体重编程诱导小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts, MEFs)为非整合型诱导多潜能干细胞,并在体外定向分化为神经干细胞(neural stem cells, NSCs),为神经干细胞移植治疗神经损伤提供稳定、安全的细胞来源。方法使用电转仪将质粒pEP4-EO2S-ET2K转入小鼠MEFs,经诱导培养重编程为诱导多潜能干细胞(induced pluripotent stem cells, iPSCs), iPSCs在不同诱导培养基中经2次悬浮及贴壁培养分化为NSCs,在体内及体外实验鉴定iPSCs多向分化潜能特性及NSCs特性。结果体内外实验显示iPSCs具有与胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)相似的多向分化潜能,且不整合外源性基因。iPSCs进一步分化的NSCs其相关标志基因表达与野生型NSCs相近,且较iPSCs显著增加,免疫荧光显示NSCs高表达NSC标志物NESTIN及PAX6,在体外存活能分化为神经元、少突胶质细胞及星形胶质细胞。结论游离质粒能重编程诱导非整合型iPSCs,并定向分化为神经干细胞及神经元,是神经损伤修复的理想种子细胞。

关键词：游离质粒载体、非整合型诱导多潜能干细胞、神经干细胞

所属期刊栏目：34

分类号：Q813;R318(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金资助项目31170947,31470949,81472122;广东省自然科学基金资助项目S2012020011099, S2013010016413;广东省科技计划2012B060300008;教育部博士点新教师基金资助项目20100171120088;广州市科技计划2013J4100062

在线出版日期：2017-01-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：647-654