第三代慢病毒包装体系的建立及大鼠IRF1重组干扰慢病毒的生产

摘要：

目的:建立安全稳定的第三代慢病毒包装体系并生产出可用于干扰大鼠IRF1基因的干扰病毒颗粒.方法:1)利用带有荧光的高表达质粒对包装的质粒比例、转染试剂进行探索,根据流式细胞仪(fluorescence activated cell sorter,FACS)对病毒滴度的测定结果,建立性价比最高的第三代慢病毒包装体系.根据慢病毒可以整合的特性,建立利用real-time PCR测定没有荧光的慢病毒颗粒滴度的方法.2)设计针对大鼠IRF1的干扰序列并筛选出最佳干扰序列,利用建立好的慢病毒包装体系生产大鼠的IRF1病毒颗粒,并检测滴度.结果:1)成功建立了稳定的第三代慢病毒包装系统和利用real-time PCR方法检测无荧光病毒的滴度检测方法.2)筛选出针对大鼠IRF1的干扰序列,利用该序列生产出慢病毒颗粒,并测定了滴度以进行下一步的细胞及在体研究.结论:1)第三代慢病毒包装体系已被成功建立.2)获得了针对大鼠IRF1的重组干扰慢病毒.

关键词：分子生物学、第三代慢病毒载体、滴度测定、IRF1

所属期刊栏目：9

分类号：Q71(生物大分子的结构和功能)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2021-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：1577-1586