脂肪甘油三酯脂酶载体构建

摘要：

目的:研究旨在构建脂肪甘油三酯脂酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)基因的表达载体.方法:调取C57BL/6小鼠ATGL基因的cDNA文库,并使用高保真Taq酶克隆出含有相应酶切位点的ATGL编码区全序列,并通过基因测序验证序列准确性.得到的目的基因片段利用T4链接酶接入pBluescriptⅡ质粒中,并再一次通过基因测序确定重组质粒连接的准确性.建好的质粒继而转染HEK293细胞,检测细胞中ATGL的mRNA和蛋白水平.结果:PCR产物双酶切和基因测序确定连接正确,细胞中ATGL的mRNA和蛋白表达量显著增高.结论:成功构建了C57BL/6小鼠ATGL基因的表达载体,建好的载体可用于ATGL基因功能的后续研究.

关键词：预防医学与卫生学其他学科、脂肪甘油三酯脂酶、C57BL/6小鼠、载体构建

所属期刊栏目：8

分类号：R-331(医学研究方法)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金20112307130002

在线出版日期：2021-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1204-1208