ΔNp63α及其SAM结构域的原核及真核表达

摘要：

为建立高效的ΔNp63α及其SAM(sterile alpha motif)结构域的真核细胞表达和原核细胞表达及蛋白纯化体系并进一步研究ΔNp63α的功能,研究扩增出人ΔNp63α及其SAM结构域编码序列,闭幕并克隆至慢病毒表达载体pCMV-phage和原核表达载体pGEX-6P-1.通过将构建的pCMV-phage-ΔNp63α包装至慢病毒颗粒,感染人头颈鳞状细胞癌FaDu细胞后,用Western blotting检测到ΔNp63α能在FaDu细胞中有效地过表达;DNA损伤药物Doxorubicin(Dox)处理能诱导FaDu细胞发生凋亡,而用pCMV-phage-ΔNp63α在FaDu细胞过表达则能有效挽救Dox诱导的细胞凋亡;通过将构建的pGEX-6P-1-ΔNp63α或pGEX-6P-1-SAM转化至BL-21,成功诱导表达并纯化出GST融合的ΔNp63α及其SAM结构域蛋白.研究证实了ΔNp63α在抑制细胞凋亡中具有重要作用,并为进一步研究ΔNp63α及其SAM结构域的功能奠定了基础.

关键词：医学生物化学、ΔNp63α、慢病毒载体、GST融合蛋白纯化

所属期刊栏目：8

分类号：Q7(分子生物学)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金新教师类20110181120082

在线出版日期：2021-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1141-1146