1型鸭肝炎病毒E53株VP1基因的原核表达及多克隆抗体的制备

摘要：

利用RT-PCR技术扩增1型鸭肝炎病毒(duck hepatitis virus type 1,DHV-1) E53株VP1基因序列,将其连入pET-30a载体中,构建原核表达载体pET-30a-VP1,并转化至宿主菌Rosetta(DE53) plysS中.经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后,SDS-PAGE分析表明VP1蛋白在大肠杆菌中成功表达,Western blotting表明该表达产物具有良好的反应原性.将表达产物纯化后免疫新西兰大白兔,制备的多克隆抗体可特异性识别DHV-1,间接ELISA测定多克隆抗体效价达1∶12800,中和实验测定多克隆抗体中和抗体效价达1∶32.该研究表达的蛋白和制备的多克隆抗体为VP1蛋白功能的进一步研究和诊断制剂的开发提供了重要数据和材料.

关键词：兽医免疫学、1型鸭肝炎病毒、VP1、原核表达、免疫原性、中和活性

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分类号：R392

资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金;黑龙江省科技攻关计划;黑龙江省科技攻关计划

在线出版日期：2021-11-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1058-1063