雷公藤甲素对大鼠坐骨神经冷保存后细胞活性及 异体移植后神经再生的影响

摘要：

目的 探讨雷公藤甲素(T10)对冷保存大鼠坐骨神经生物活性和异体移植后神经再生的影响.方法 取对数生长期施万细胞(SCs),CCK-8检测1×10-6 mol/L、1×10-7 mol/L、1×10-8 mol/L、1×10-9 mol/L T10溶液对SCs增殖的影响.取Sprague-Dawley大鼠双侧坐骨神经15 mm,分别在含0 mol/L、1×10-6 mol/L、1×10-7 mol/L、1×10-8 mol/L、1×10-9 mol/L T10的DMEM液中,4℃或37℃放置24 h(n=6),Western blotting检测神经生长因子(NGF)、神经胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达.另取大鼠坐骨神经15 mm,随机分成新鲜神经组(A组,n=30)、DMEM保存组(B组,n=30)、T10保存组(C组,n=30)、T10预处理后DMEM保存组(D组,n=30)、T10预处理后T10保存组(E组,n=30),4℃保存4周,Calcein-AM/PI双染激光共聚焦显微镜观察、流式细胞术检测神经活细胞、死细胞数,Western blotting检测主要组织相容性复合体-Ⅰ(MHC-Ⅰ)、MHC-Ⅱ、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达.用上述坐骨神经修复Wistar大鼠坐骨神经10 mm缺损(A′组、B′组、C′组、D′组、E′组,n=10),设立同系移植新鲜组(F′组,n=10).术后16周,电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和运动神经传导速度(MNCV);取移植段神经,观察神经纤维数和神经超微结构.结果 SCs在浓度为1×10-9～1×10-7 mol/L T10溶液下,细胞增殖与对照组无显著性差异(P>0.05).各浓度T10溶液下,大鼠坐骨神经各神经营养因子表达均37℃明显高于4℃;相同温度时,1×10-8 mol/L组各神经营养因子表达均高于其他浓度组(P<0.05).大鼠坐骨神经冷保存4周后,与B、C、D组相比,E组神经活细胞数量多,MHC-I、MHC-II、ICAM-1表达降低(P<0.05).移植术后16周,E′组CMAP、MNCV、再生有髓神经纤维数量均优于A′、B′、C′、D′组(P<0.05),E′、F′组有髓神经纤维数量多,粗细均匀,分布广泛,髓鞘厚.结论 一定浓度T10体外能诱导大鼠坐骨神经神经营养因子表达,提高冷保存神经生物活性,降低免疫原性,促进异体移植后受体神经再生;冷保存前用一定浓度T10预处理效果更好.

关键词：异体神经移植、周围神经保存、冷保存损伤、雷公藤甲素、神经再生、坐骨神经、大鼠

所属期刊栏目：24

分类号：R745(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金面上项目81373668,81674002

在线出版日期：2018-12-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：1271-1279