重组人BMP-7真核表达质粒的构建及转染软骨细胞后的表达

摘要：

[目的]构建重组人骨形成蛋白-7(rhBMP-7)基因真核表达质粒,转染兔关节软骨细胞,探讨外源性人rhBMP-7基因在转染软骨细胞中的表达情况及对细胞生物学性状的影响.[方法]采用PCR技术扩增rhBMP-7基因,将其插入真核表达载体pcDNA 3.1中,体外分离培养兔关节软骨细胞,然后用构建的rhBMP-7质粒转染软骨细胞,经G418筛选、免疫组化染色和逆转录PCR检测其表达,同时检测表达产物对维持软骨细胞表型的作用.[结果]经过PCR及酶切鉴定证实获得了BMP-7真核表达质粒pcDNA 3.1-rhBMP-7,通过免疫组化染色和逆转录PCR鉴定证实rhBMP-7在转染后的软骨细胞中得到了表达,其表达产物促进软骨细胞表型的维持.[结论]外源性rhBMP-7基因转染软骨细胞可以获得高效表达,并具有一定的维持软骨细胞表型的作用,为软骨组织工程的研究提供了改良的种子细胞.

关键词：骨形成蛋白-7、基因转染、软骨细胞

所属期刊栏目：14

分类号：R687(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：广东省科技厅科技计划2003A30201027;广东省医药卫生科研项目B2002040

在线出版日期：2006-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：845-848