10.3969/j.issn.1000-7423.2002.05.006
旋毛虫成囊前期幼虫抗原结构基因TspE1的克隆与表达
目的克隆和表达旋毛虫河南地理株成囊前期幼虫编码31 kDa抗原的结构基因(TspE1).方法大鼠感染旋毛虫后第17天收集成囊前期幼虫,提取虫体的总RNA.通过RT-PCR特异性扩增目的基因,构建重组质粒pUC18/Ts-HN3,将重组质粒pUC18/Ts-HN3中的目的基因亚克隆入原核表达载体pGEMEX-1,构建重组子pGEMEX-1/Ts-HN3,经IPTG诱导,在E..coli JM109(DE3)中表达.对表达产物进行SDS-PAGE分析和Westem blotting鉴定.结果SDS-PAGE显示目的基因在大肠杆菌中获得高效表达,重组蛋白的分子量为31 kDa,以诱导4 h时表达量最多.薄层凝胶光密度扫描分析结果显示,表达的融合蛋白量约占细菌总蛋白的26%.Westem blotting证实,融合蛋白条带能被感染旋毛虫的大鼠血清及旋毛虫病患者血清识别.结论旋毛虫河南地理株成囊前期幼虫抗原结构基因TspE1克隆和原核表达成功.
旋毛虫(河南地理株)、成囊前期幼虫、31kDa抗原、分子克隆、表达
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R383.15(医学寄生虫学)
河南省科技攻关项目981170833;河南省高校青年骨干教师资助项目2001041
2004-08-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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