鸡圆环病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立

摘要：

为快速准确检测鸡圆环病毒(CCV),试验根据CCV Rep基因设计特异性引物,以CCV阳性病料提取的DNA为模板进行PCR扩增,构建CCV重组质粒,建立检测CCV的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法.结果显示:试验建立的方法对2.87×108～2.87×101 copies/μL浓度范围的CCV重组质粒标准品呈现良好的线性关系,相关系数(R2)为0.993 6,灵敏度比常规PCR高100倍;该方法对鸡传染性贫血病毒、新城疫病毒、传染性支气管炎病毒等常见鸡病毒性病原以及多杀性巴氏杆菌、禽致病性大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌无特异性扩增,批内和批间变异系数均不超过1%;该方法对60份疑似CCV感染临床样品检测结果显示,CCV阳性检出率(16.67%)高于常规PCR.上述结果表明,研究建立的CCV SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,检出限为2.87×101 copies/μL,可以用于CCV的快速定量检测.

关键词：鸡圆环病毒、SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR、检测方法

所属期刊栏目：46

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：山东省自然科学基金青年项目;青岛农业大学高层人才科研基金

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：56-61