实时荧光定量TaqMan RT-PCR检测鸭坦布苏病毒方法的建立及初步应用

摘要：

研究旨在建立一种适用于鸭坦布苏病毒检测的荧光定量TaqMan RT-PCR技术.以JXSP株RNA为模板,建立检测鸭坦布苏病毒的实时荧光定量RT-PCR方法.制备含有上述目的片段的RNA作为标准品,10倍比稀释后建立标准曲线,测定敏感性.同时采用标准品对该方法的批内和批间重复性进行检测,并与本实验室所保存的多种病毒进行特异性检测.结果:建立的荧光定量TaqMan RT-PCR方法能在鸭坦布苏病毒JXSP株RNA样本中检出荧光信号.最低检出量为2.06×101拷贝/反应;线性范围达9个数量级.该方法重复性良好,批内变异系数不足0.4％;批间变异系数不足2.2％.该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,经体外感染细胞培养物及临床样品检测证实,该方法可实时反映病毒液中的病毒含量,可在获得样品后3h以内得到检测结果,可用于临床样品中鸭坦布苏病毒的快速检测.

关键词：鸭坦布苏病毒、实时荧光定量RT-PCR、TaqMan探针

所属期刊栏目：39

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;国家重点研发计划

在线出版日期：2017-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：23-26