PEG-itTM纯化浓缩J亚群禽白血病病毒效果的鉴定

摘要：

为建立一种不利用超速离心法纯化浓缩J亚群禽白血病病毒(ALV-J)简便、易行的方法,利用PEG-itTM病毒浓缩试剂与病毒培养细胞上清按比例混合,4℃低速离心,最后用无菌的预冷PBS进行重悬,取100 μL病毒液进行TCID50的测定,同时利用电镜负染、SDS-PAGE银染及Western blot的方法对浓缩纯化后的病毒进行鉴定.结果表明:经过PEG-itTM浓缩纯化病毒滴度提高10～100倍,滴度可达到1×107 TCID5dmL;透射电镜负染观察结果表明,病毒粒子呈卵圆形,直径80～120 nm,并清晰可见囊膜上均匀密布的纤突;Western blot和银染结果显示,经过PEG-itTM浓缩纯化的病毒杂蛋白明显减少,且具有良好的抗原性,能够被鸡多抗血清识别.提示在没有超高速离心机的情况下,可以使用PEG-itTM纯化浓缩ALV-J,该方法使用方便,能满足大多数试验的需求.

关键词：PEG-itTM病毒浓缩试剂、ALV-J、浓缩纯化、鉴定

所属期刊栏目：39

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家重点研发计划;江苏省高等学校自然科学研究项目;江苏高校优势学科建设工程项目;公益性行业农业科研专项;扬州大学新世纪人才项目

在线出版日期：2017-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：21-25