新城疫病毒Clone 30株辅助表达系统的构建及真核表达

摘要：

为研究新城疫病毒NP、P和L蛋白作用机理和新城疫病毒反向遗传操作系统,构建新城疫病毒Clone 30株NP、P和L基因的真核表达载体.根据GenBank中新城疫病毒Clone 30株的全长序列(Y18898.1),设计3对特异性引物,用RT-PCR法扩增出新城疫病毒Clone 30株的NP、P和L基因,将其克隆到真核载体pCI-neo上.通过酶切和测序验证克隆正确,得到重组质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L,瞬时转染到BHK-21细胞中.经RT-PCR、Western blot、间接免疫荧光试验分别检测NP、P和L蛋白在BHK-21细胞中的表达.结果表明,重组质粒pCI-NP、pCI-P和pCI-L构建成功,为后期新城疫病毒反向遗传操作系统的构建奠定了基础.

关键词：新城疫病毒、NP基因、P基因、L基因、辅助质粒

所属期刊栏目：38

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：徐州市科技项目;山东省家禽产业技术体系建设专项

在线出版日期：2016-06-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：26-29