鸡传染性支气管炎病毒GX-YL5株N蛋白在昆虫杆状病毒系统中的分泌表达

摘要：

以鸡传染性支气管炎病毒(I3V)广西优势血清型代表株GX-YL5为研究对象,利用RT-PCR扩增出其核蛋白(N)基因,引入昆虫细胞识别的蜂素(Honeybee melittin,HBM)信号肽,同时在C端加入6个组氨酸标签以利于纯化,将其定向克隆到转座载体pFastBacTdual中,转化DH10BacTM感受态细胞进行同源重组获得重组杆粒rHBM-N;利用脂质体介导转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒,通过间接免疫荧光(IFA)和Westem-blot鉴定表达的N蛋白.结果显示:IFA出现特异性荧光,Western-blot中细胞上清和细胞沉淀均出现51 ku的特异性条带.结果表明N蛋白获得了分泌表达且具有良好的免疫原性.研究首次引入昆虫细胞识别的HBM信号肽进行N蛋白的表达,不仅为N蛋白的生物学功能、诊断试剂以及IBV新型亚单位疫苗研究奠定了基础,也为其它蛋白的表达提供参考.

关键词：鸡传染性支气管炎病毒、N蛋白、蜂素信号肽、昆虫杆状病毒系统

所属期刊栏目：38

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;广西自然科学基金;广西自然科学基金;广西大学科研基金资助项目

在线出版日期：2016-05-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：20-24