J亚群禽白血病病毒env基因主要功能区和EGFP基因在Sf9细胞中的融合表达

摘要：

为获得具备良好抗原性和生物活性的J亚群禽白血病病毒(AL V-J)env基因主要功能区的表达产物,采用特异性引物分别从保存的pMD 18T-envHB2010质粒、PIRES2-EGFP中扩增ALV-J env基因主要功能区和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,酶切、连接后插入pFastBac Daul载体,构建杆状病毒转移载体pFastBac Daul-env-EGFP,将其转化DH 10Bac感受态细胞制备重组杆粒Bacmid-env-EGFP,转染Sf9细胞进行真核表达.结果显示,转染了重组杆粒的Sf9细胞在倒置荧光显微镜下呈现亮绿荧光;以ALV-J单克隆抗体JE9进行Western blot检测,转染重组杆粒的Sf9细胞检测出约85 ku的条带.结果表明,目的基因在Sf9细胞中得到了良好的表达,为进一步研究ALV-J提供基础试验材料.

关键词：ALV-J、env基因、EGFP、融合表达

所属期刊栏目：37

分类号：S855.3(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金31060342

在线出版日期：2015-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：23-26