流感病毒NA基因的亚细胞定位及抗病毒活性研究

摘要：

本研究利用神经氨酸酶(Neuramidinase,NA)可诱导机体产生特异性抗体,抑制流感病毒从已感染的细胞释放减少病毒增殖的特点,探索NA基因用于研制抗病转基因家禽的新思路.通过构建NA基因真核表达载体pcDNA3.0-NA和pcDNA3.0/EGFP-NA,转染NIH 3T3细胞后对NA基因进行亚细胞定位研究；用pcDNA3.0-NA转染鸡胚成纤维细胞(CEF),接种新城疫病毒(NDV)后观察CEF细胞形态,研究NA基因抗病毒能力；用pcDNA3.0-NA转染NIH 3T3细胞后提取细胞裂解液,纯化NA蛋白,以不同浓度倍比稀释后,加至铺满单层CEF细胞的96孔板,37℃孵育24h,弃去上清,接种NDV,采用微量细胞病变抑制法研究NA基因的抗病毒活性；间接免疫荧光试验和EGFP融合表达结果显示,NA蛋白定位于细胞质；NDV-CEF细胞病变抑制试验表明重组的NA蛋白具有较强的抗NDV生物活性.

关键词：流感病毒、NA、新城疫病毒、抗病毒活性

所属期刊栏目：34

分类号：S855.3;Q78;R373

资助基金：国家科技计划30871791

在线出版日期：2012-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：18-22