鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建

摘要：

根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序.经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因组全长cDNA,其5'端具有完整的T7 KNA聚合酶启动子的核心序列,3'端具有polyA尾巴结构通过T7 RNA聚合酶体外转录系统合成病毒基因组RNA,转染BHK-21细胞并进行病毒拯救.采用RT-PCR、测序及鸡胚传代对拯救出的病毒株进行鉴定.结果表明成功地从H120株的基因组全长cDNA拯救出病毒H120-R株,为进一步开展该病毒的分子致病机理研究、新型疫苗的研制等奠定了基础.

关键词：传染性支气管炎病毒、H120疫苗株、感染性克隆、病毒拯救

所属期刊栏目：32

分类号：S831;R3;Q933

资助基金：江苏省自然科学基金;江苏省家禽科学研究所科研基金

在线出版日期：2011-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：22-26