巨噬细胞抑制因子在毕赤酵母中的表达及鉴定

摘要：

目的:在毕赤酵母表达系统中获得巨噬细胞抑制因子(MIC-1)高效分泌表达,并鉴定其免疫活性.方法:从BeWo细胞系中提取总RNA,通过反转录PCR获得目的片段,然后将基因亚克隆人pPIC9k表达载体,线性化后转化GS115酵母细胞,经G418抗性筛选获多拷贝重组子并诱导表达,PCR鉴定目的基因的整合.表达产物用Western blot鉴定生物活性.结果:经过G418筛选到34株阳性克隆,MIC-1蛋白最高表达量为6.332mg/L.结论:成功构建了MIC-1表达载体,在酵母中获得多拷贝高效表达,并且形成正确的蛋白结构.

关键词：巨噬细胞抑制因子(MIC-1)、毕赤酵母表达系统、pPIC9k质粒

所属期刊栏目：13

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家科技攻关项目2002BA709B10

在线出版日期：2006-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：409-413