DDR2调控LncRNA UCA1/miR-590-3p轴对骨关节炎软骨细胞炎症因子释放和MMPs表达的影响

摘要：

目的 探讨盘状结构域受体(discoidin domain receptor,DDR2)调控长链非编码RNA-尿路上皮癌相关分子1(long noncoding RNA-urothelial carcinoma antigen 1,LncRNA UCA1)/miR-590-3p轴对骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞炎症因子释放和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)表达的影响及机制.方法 采用RT-qPCR检测DDR2、LncRNA UCA1和miR-590-3p在OA软骨细胞和正常软骨细胞中的表达水平;在OA软骨细胞中分别转染sh-UCA1、miR-590-3p mimics、LV-UCA1和LV-UCA1+miR-590-3p mimics后实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测白介素-6(interleukin-6,IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)的表达水平,RT-qPCR和蛋白质印迹(western blot,WB)检测MMP-3和MMP-13的表达水平.双荧光素酶基因报告检测LncRNA UCA1和miR-590-3p的结合情况;RNA免疫共沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)检测LncRNA UCA1与miR-590-3p和Argonaut-2蛋白(Ago-2)的结合情况.结果 在OA患者软骨细胞中DDR2和LncRNA UCA1的表达水平明显高于正常软骨细胞,miR-590-3p的表达水平明显低于正常软骨细胞.DDR2能够促进LncRNA UCA1的表达和抑制miR-590-3p的表达.双荧光素酶基因报告和RIP结果显示LncRNA UCA1能够通过ceRNA机制靶向抑制miR-590-3p的表达.低表达LncRNA UCA1和过表达miR-590-3p能够显著抑制IL-6、TNF-α、MMP-3和MMP-13的表达水平.过表达LncRNA UCA1能够显著促进IL-6、TNF-α、MMP-3和MMP-13的表达水平,同时过表达UCA1和miR-590-3p能够反转单独过表达LncRNA UCA1对OA软骨细胞炎症因子释放和MMPs表达的影响.结论 DDR2能够上调LncRNA UCA1,LncRNA UCA1通过ceRNA机制靶向抑制miR-590-3p,进而促进OA软骨细胞炎症因子释放和MMPs的表达.

关键词：骨关节炎、盘状结构域受体2、RNA、长链非编码、基质金属蛋白酶、炎症因子

所属期刊栏目：12

分类号：R684.3(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：陕西省重点研发计划2022SF-229

在线出版日期：2023-05-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：278-284