人参皂苷Rb2体内抑制破骨细胞的作用及其机制研究

摘要：

目的 探究人参皂苷Rb2在体内调控破骨细胞的作用及机制.方法 通过去势建立小鼠骨质疏松模型,分为4组(假手术组,去势组,低剂量组,高剂量组),腹腔注射不同浓度Rb2溶液[低剂量组5 mg/(kg·d),高剂量组20 mg/(kg·d),假手术组、去势组注射蒸馏水],常规饲养12周.使用Elisa试剂盒检测血清破骨细胞活性指标抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant factor acid phosphatase,TRAP)、Ⅰ型胶原C端肽(C-terminal telopeptide-Ⅰ,CTX-1)水平,股骨远端TRAP染色,从髓腔中提取和培养原代破骨细胞,TRAP染色并计数检测破骨细胞分化情况,Western-blot技术检测原代破骨细胞核因子κB (nuclear factor kappa-B,NF-κB)p65蛋白及自噬相关分子自噬标志轻链3(autophagy marker light chain 3,LC3)、哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、5'-磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine 5'-monophosphateactivated protein kinase,AMPK)、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,pAMPK)蛋白表达水平.结果 去势小鼠血清TRAP(64.10±1.18) pg/ml、CTX-1(70.43±1.71)ng/ml浓度最高,其余各组血清指标明显降低,高剂量组尤甚[分别为(44.62±2.02) pg/ml和(49.55±2.72)ng/ml](P＜0.01).去势组股骨远端TRAP染色阳性细胞密集,阳性区域最大,随着Rb2浓度增加,TRAP染色阳性区域面积减少(P＜0.05).去势组多核破骨细胞数量最多(152.00±18.55/孔),低剂量组(118.40±18.46/孔)和高剂量组(99.60±13.89/孔).TRAP染色阳性细胞数量均有不同程度减少,低剂量组最少(84.00±15.23/孔),各组P＜0.01.与去势组相比,各组NF-κB在细胞质增加(P＜0.05),在细胞核减少(P＜0.01);各组mTOR表达减少,AMPK、pAMPK表达增加,LC3 Ⅱ/LC3 Ⅰ比值增高(P＜0.05).结论 人参皂苷Rb2在体内通过抑制NF-κB信号通路以及调控mTOR介导的自噬信号通路抑制破骨细胞.

关键词：骨质疏松、破骨细胞、NF-κB、自噬、人参皂苷Rb2

所属期刊栏目：9

分类号：R681(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：国家自然科学基金81570801

在线出版日期：2020-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：293-298