LncRNA HOTAIR调控miR-130a-3p对骨关节炎软骨细胞增殖和分化的影响

摘要：

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOX转录物反义RNA(HOTAIR)对骨关节炎(osteo-arthritis,OA)软骨细胞增殖和分化的影响及机制.方法 采用RT-PCR检测OA患者和半月板损伤患者膝关节软骨组织中HOTAIR的表达水平;在OA软骨细胞中转染siRNA-HOTAIR(si-HOTAIR)或过表达HOTAIR的慢病毒载体(LV-HOTAIR),采用CCK8法检测细胞增殖情况,RT-PCR和western blot检测BMP2、BMP4、BMP6和RUNX2 mRNA和蛋白表达水平.结果 HOTAIR在OA患者膝关节软骨组织中的表达水平明显高于半月板损伤患者[(3.217±0.650)vs.(1.161±0.316),P=0.000];同时在OA软骨细胞的表达水平明显高于正常软骨细胞[(1.467±0.121)vs.(1.030±0.119),P=0.012].在OA软骨细胞转染si-HOTAIR后,OA软骨细胞增殖能力增加[(1.190±0.099)vs.(0.83±0.057),P=0.005],分化相关分子BMP2、BMP4、BMP6、RUNX2 mRNA和蛋白表达水平明显升高[(1.805±0.078)vs.(1.050±0.132),(1.635±0.092)vs.(1.023±0.068),(1.715±0.064)vs.(1.053±0.119),(1.702±0.068)vs.(1.003±0.075),P=0.001,0.000,0.001,0.000].在OA软骨细胞转染LV-HOTAIR后,OA软骨细胞增殖[(0.645±0.064)vs.(0.890±0.028),P=0.004]和分化[(0.704±0.071)vs.(1.009±0.088),(0.636±0.074)vs.(1.003±0.031),(0.645±0.068)vs.(1.014±0.068),(0.693±0.071)vs.(0.994±0.044),P=0.009,0.001,0.003,0.003]明显抑制.miR-130a-3p在OA软骨细胞的表达水平明显低于正常软骨细胞[(0.463±0.104)vs.(0.990±0.092),P=0.003],同时HOTAIR和miR-130a-3p在OA患者膝关节软骨组织中的表达呈负相关(R=-0.977,P=0.000),双荧光素酶结果显示HOTAIR能够靶向结合miR-130a-3p[(0.970±0.065)vs.(0.560±0.038),P=0.001].在共转染si-HOTAIR和miR-130a-3p inhibitors后能够逆转低表达HOTAIR对OA软骨细胞增殖和分化的影响(P均>0.05),然而在共转染si-HOTAIR和miR-130a-3p mimics后能够进一步加强低表达HOTAIR对OA软骨细胞增殖[(1.505±0.078)vs.(1.190±0.099),P=0.000]和分化[(2.510±0.085)vs.(1.820±0.085),(2.175±0.134)vs.(1.660±0.113),(2.050±0.212)vs.(1.690±0.057),(2.400±0.141)vs.(1.691±0.028),P=0.000,0.000,0.000,0.000]的促进作用.讨论HOTAIR在OA患者和软骨细胞中均明显高表达,并能够通过靶向调控miR-130a-3p抑制OA软骨细胞增殖和分化.HOTAIR可能成为OA患者治疗的一个潜在靶点.

关键词：骨关节炎、细胞增殖、细胞分化、软骨细胞、lncRNAHOTAIR、miR-130a-3p

所属期刊栏目：8

分类号：R684.3;Q291(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

在线出版日期：2020-01-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：931-937