antimiR-138修饰骨髓基质干细胞膜片的可行性及其促进同种冻干骨粉成骨的研究

摘要：

目的：探索采用非病毒方法转染骨髓基质干细胞( bone mesenchymal stem cells，BMSC )膜片的可行性；antimiR-138转染的 BMSC 膜片促进同种冻干骨粉( FDB )成骨的可行性。方法采用 Vc 连续诱导法培养 BMSC 膜片，通过调整 Lipofectamine 2000-miRNAs 载体复合物的用量及转染步骤对 BMSC 膜片进行转染；采用荧光体式及显微观察、miRNA-PCR 方法比较各组的转染效率的差异；通过大体观察、HE 染色和扫描电镜观察 BMSC 膜片的形态。将 BMSC 膜片/ FDB 复合物移植到裸鼠皮下，术后4～8周，分别采用 HE 和 MT 染色对膜片的成骨能力进行评估。结果荧光体式及显微结果表明 antimiR-138可成功地转至 BMSC 膜片中，其中150 nM 组对内源性 miR-138的抑制率为85%；体内异位成骨实验表明 antimiR-138转染的 BMSC 膜片可显著促进并加速移植复合物的骨组织形成。结论(1)通过对以 Lipofectamine 2000为载体的转染复合物的用量及转染步骤进行优化，可以构建出具有较高转染效率，良好的细胞相容性以及结构完整的 antimiR-138修饰的 BMSC 膜片。(2) antimiR-138转染的 BMSC 膜片可显著促进并加速移植复合物的异位骨组织形成。

关键词：间质干细胞、转染、MicroRNAs、移植、同种、骨生成、细胞膜片

分类号：R318(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金项目81501611;81470785

在线出版日期：2015-12-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：856-863