人BDNF重组逆转录病毒载体的构建

摘要：

目的构建PLEGFP-BDNF真核表达重组逆转录病毒,为进一步在细胞中表达及移植治疗作准备.方法按照hBDNF基因全长编码序列设计合成引物,从人基因组DNA中扩增出744bp的hBDNF基因片段,插入到PMD18-T载体上,转化DH5α大肠杆菌菌株,获得PMD18T-BDNF克隆,对该克隆进行 限制性酶切分析和DNA序列测定;从阳性克隆中获取hBDNF全长编码片段,与真核表达载体PLEGFP质粒连接,构建PLEGFP-BDNF真核表达重组质粒.重组质粒转化大肠杆菌JM109,再经氨苄LB培养基筛选,酶切,PCR与测序鉴定.结果PLEGFP-BDNF重组逆转录病毒构建成功.结论hBDNF在大肠杆菌中的成功表达在转基因治疗CNS病变方面具有潜在应用价值.

关键词：h.BDNF、基因克隆、重组逆转录病毒载体、质粒

所属期刊栏目：4

分类号：R3(基础医学)

资助基金：云南省自然科学基金2002C0070M

在线出版日期：2006-07-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：224-227