人胚胎干细胞H9诱导分化收缩型平滑肌细胞的方法研究

摘要：

目的 改进人胚胎干细胞H9向收缩型平滑肌分化方法的研究.方法 从形态和细胞免疫荧光、碱性磷酸酶(ALP)鉴定人胚胎干细胞(human embryonic stem cell,hESC)的全能性.采用单层培养H9诱导分化为中胚层(mesoderm,MES),进而改进诱导方法分化为收缩型平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC).采用real-time PCR、western blotting、细胞免疫荧光化学技术以及流式细胞术鉴定诱导分化方法的合理性以及效率.结果 hESC表面标志物蛋白分子OCT-4在细胞核内表达呈阳性(绿色),ALP显示呈黑紫色.Real-time PCR结果显示,随着时间的推移,VSMC标志基因a-SMC、SM22a、CALPONIN在一定的时间节点后呈爆发式上升;western blotting显示第6天后开始递增表达;细胞免疫荧光显示,分化18天的细胞a-SMC阳性表达(绿色);流式细胞术结果表明,分化第15天时,a-SMC阳性细胞达90％以上.结论 改进后的诱导体系更适合H9向收缩型VSMC分化.

关键词：ESC、VSMC、收缩型、诱导分化

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资助基金：中央高校基本科研业务费专项资金基础研究能力提升计划22120170143

在线出版日期：2018-11-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2576-2580