促红细胞生成素基因修饰对H2O2诱导的小鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响
目的 观察EPO基因修饰对H2O2诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)凋亡及相关细胞信号传导通路的影响.方法 体外培养小鼠MSCs,制作慢病毒载体并转染EPO基因至第6代MSCs,进行细胞鉴定,ELISA法测定细胞上清液中EPO浓度,Western blot方法检测基因修饰前后PI3K/Akt及NF-κB通路蛋白表达,流式细胞术测定细胞凋亡情况.结果 成功地制作慢病毒载体,并将EPO基因转染至小鼠MSCs,转染前后细胞表面标志未发生明显变化,转染后细胞上清液中EPO浓度显著升高(P<0.01).基因修饰可使小鼠MSCs的PI3K/Akt磷酸化水平及总的NF-κB水平升高,但对MSCs的NF-κB磷酸化水平和总的Akt水平无明显影响.转染组凋亡细胞所占百分率低于对照组(P<0.01).结论 EPO基因修饰后提高了MSCs的分泌EPO能力,并且具有抑制H2O2诱导的MSCs凋亡的作用.其抗凋亡作用可能与PI3K/Akt及NF-κB信号通路有关.
促红细胞生成素、转染、间充质干细胞、凋亡、信号途径
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R714.26;G804.2;S826
2015-08-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1350-1353