HSP70-GST融合蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的构建小鼠热休克蛋白70(HSP70)重组原核表达质粒,获取小鼠HSP70-GST融合蛋白.方法先用RT-PCR方法从小鼠脑基因组中扩增出HSP70基因cDNA序列,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pMD-Tvector,经DNA测序证实基因碱基无误后,亚克隆到原核表达质粒pGEX-4T-1中进行表达.结果表达产物经Western Blot分析,在109KD处有一明显特异带,与预期结果相符.结论构建重组融合表达载体pGEX-HSP70,用基因工程的方法在原核细胞中成功表达出小鼠HSP70-GST融合蛋白.

关键词：RT-PCR、热休克蛋白70、基因表达

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分类号：R3(基础医学)

资助基金：北京市教委共建项目KM200410025006;教育部科学技术研究项目204005

在线出版日期：2006-06-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：85-87