10.7620/zgfybj.j.issn.1001-4411.2016.05.62
miR-140通过下调Pin1抑制乳腺癌BT549细胞上皮细胞-间充质转化
目的 用miR-140模拟物转染三阴型乳腺癌BT549细胞,检测Pin1在乳腺癌细胞系BT549中的表达情况,研究在BT549细胞中miR-140如何通过Pin1发挥对上皮细胞-间充质转化(EMT)的抑制作用.方法 用miR-140模拟物(miR-140模拟物组)、miR-140阴性对照(阴性对照组)转染BT549细胞,同时设置未处理组为空白对照组.利用实时PCR法检测不同组BT549细胞中的Pin1 mRNA表达水平;利用Western Blot检测E-钙黏蛋白及Pin1蛋白的表达水平;利用划痕试验研究转染miR-140对BT549侵袭能力的影响.结果 划痕后24 h,miR-140模拟物组、阴性对照组和空白对照组划痕宽度相对0h变化的比例分别为23.4%、41.4%和53.1%.与阴性对照组和空白对照组相比,miR-140模拟物组BT549细胞迁移能力明显降低(x2=5.550,P<0.05;x2=6.995,P<0.05).miR-140模拟物组、阴性对照组和空白对照组Pin1 mRNA表达水平分别为(0.55±0.02)、(0.89±0.06)和(1.05-±0.06).miR-140模拟物组Pin1 mRNA表达水平显著低于阴性对照组和空白对照组(t=8.823,P<0.05;t=11.480,P<0.05).miR-140模拟物组、阴性对照组和空白对照组E-钙黏蛋白表达水平分别为(0.98±0.11)、(0.68±0.07)和(0.38±0.04).miR-140模拟物组E-钙黏蛋白表达水平显著高于阴性对照组和空白对照组(t=7.990,P<0.05;t=21.348,P<0.05).miR-140模拟物组、阴性对照组和空白对照组Pin1蛋白表达水平分别为(0.57±0.12)、(0.78±0.08)和(1.08±0.21).miR-140模拟物组Pin1蛋白表达水平显著低于阴性对照组和空白对照组(t=8.921,P<0.05;t=18.657,P<0.05).结论 miR-140可以抑制Pin1 mRNA转录,进而降低Pin1蛋白的表达水平,抑制EMT的发生.
乳腺癌细胞系、miR-140、Pin1、上皮细胞-间充质转化
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R73-36(肿瘤学)
2016-04-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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