去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响

摘要：

目的 观察去血清饥饿法对卵巢颗粒细胞自噬因子LC3和Beclin-1表达的影响.方法 用去血清的培养液诱导处于对数生长期的颗粒细胞,0、4、12、24 h后用单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色法检测自噬体的形成,反转录-聚合酶链反应(RT-PCT)和Western blot方法分别检测颗粒细胞微管相关蛋白1轻链3(MAPLC3)和Beclin-1 mRNA和蛋白的表达.结果 随着去血清时间的延长,MDC阳性细胞数及自噬泡数量增多;4h后LC3-Ⅱ及Beclin-1 mRNA表达开始增加,且随着时间增加有增加趋势[LC3-Ⅱ:(0.21±0.02)、(0.45±0.12)、(0.60±0.05)、(0.74±0.03),P＜0.05;Beclin-1:(0.20±0.06)、(0.37±0.11)、(0.52±0.07)、(0.69±0.07),P＜0.05];4h后蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加,Beclin-1蛋白表达亦增加,且随时间增加有增加的趋势[LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ:(0.12±0.05)、(0.32±0.09)、(0.63±0.07)、(0.92±0.04),P＜0.01;Beclin-1:0,(61±0.01)、(0.83±0.11)、(1.09 ±0.05)、(1.35±0.10),P＜0.05].结论 去血清饥饿可诱导颗粒细胞自噬的发生,这可能与卵泡发育和闭锁的发生、发展有关.

关键词：去血清饥饿法、颗粒细胞、自噬因子、LC3、Beclin-1

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分类号：R339.2(人体生理学)

资助基金：嘉兴市科技局课题2013AY21046资助;浙江省教育厅科研项目资助Y201534052;浙江省大学生创新项目资助2015R417003

在线出版日期：2016-04-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1045-1047