抗心肌肌凝蛋白重链的单链抗体VH和VL基因的合成

摘要：

目的 为研制心肌显像剂—抗人心肌肌凝蛋白重链(HCMHC)的单链抗体,合成抗HCMHC单链抗体的VH和VL基因.方法 用TRIZOL试剂从抗HCMHC McAb杂交瘤细胞提取总RNA,合成第一链cDNA,以这第一链cDNA为模板,用合成的特异引物、DNA聚合酶和四种单核苷酸,对重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因进行PCR扩增.对各步骤的产物进行鉴定,并做了对RNA的稳定性与贮存温度的关系,MgCl2浓度和循环温度的最优化的选择.结果 合成的第一链cDNA纯度达95％;扩增产物的琼脂糖凝胶电泳带呈单一明亮泳带,VH和VL基因分子量分别为340bp和320bp,与文献相一致.结论 成功合成了VH和VL基因,为心肌显像及其显像剂抗HCMHC单链可变区抗体的研究打下了基础.

关键词：心肌肌球蛋白重链、可变区抗体、VH基因、VL基因

所属期刊栏目：21

分类号：R817.4(放射医学)

在线出版日期：2012-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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