WORTMANNIN对细胞辐射反应性的影响
目的 了解磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol-3 Kinase,PI-3K)的特异性抑制剂WORTMANNIN(WT)对细胞辐射反应性的影响.方法 将处于对数生长期的LP3细胞经不同浓度WT作用1h,进行60Coγ射线照射,继续进行克隆培养,制作剂量存活曲线.应用180°脉冲场琼脂糖凝胶电泳,检测受20Gyγ射线照射后细胞DNA双链断裂及其修复.继续用迁移率变化分析(Eloctrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)观察转录因子NF-kB的相应变化.结果 发现WT可以增加SP3细胞的辐射敏感性,最佳增敏浓度在20μmol/L以上;明显增敏效应时间在6h以内;DNA凝胶电泳实验显示,随着受照后时间的延长,受50μmol/LWT作用的细胞DN进入凝胶的量均高于单纯受照射组;转录因子NF-kB的结合活性在受照后6h内都经历了一个由低升高,然后降低的过程,大概在照后3h是这个变化的峰值.结论 提示存在PI-3K介导的辐射增敏信号途径.电离辐射可能通过激活NF-kB,进而促使一些与DNA损伤修复和细胞其它防御机制有关的基因活动,以减轻辐射损伤.WT有可能是通过阻滞这一过程的早期阶段而发生辐射增敏效应.
辐射增敏、Wortmannin、DNA损伤修复、NF-kB
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Q691
2010-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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