pVAX-WIF-1真核表达载体的构建及其抗肺癌作用

摘要：

背景与目的 WIF-1是肺癌中重要的抑癌基因之一，其编码蛋白WIF-1能够通过抑制Wnt/β-catenin信号通路达到抑制肿瘤生长增殖及促进凋亡等抗肺癌作用。本研究旨在利用美国食品和药品管理委员会认可用于临床治疗的pVAX载体，构建pVAX-WIF-1真核表达载体，初步探究pVAX-WIF-1在体内外对A549肺癌细胞的抗肿瘤作用。方法应用PCR方法扩增人WIF-1编码序列片段，构建pVAX-WIF-1载体后转染肺癌A549细胞，Western blot检测WIF-1基因的表达；采用MTT法、Hoechst3235染色和流式细胞术分别检测pVAX-WIF-1在体外对肺癌A549细胞增殖、凋亡作用的影响；构建A549小鼠皮下瘤模型，探究pVAX-WIF-1在体内的抗肺癌作用。结果真核表达质粒载体pVAX-WIF-1构建成功，pVAX-WIF-1转染A549细胞后，WIF-1蛋白表达升高。pVAX-WIF-1转染A549后能抑制细胞增殖和诱导凋亡。动物体内结果表明，pVAX-WIF-1能有效抑制肺癌肿瘤生长。结论本研究成功构建了pVAX-WIF-1真核表达质粒，pVAX-WIF-1能明显抑制A549肺癌细胞增殖和促进凋亡，有效抑制A549皮下瘤生长。本研究将为WIF-1基因的肺癌临床治疗奠定了基础。

关键词：肺癌、WIF-1基因、A549、基因治疗、真核表达载体

分类号：R73;R39

在线出版日期：2015-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：409-415