筛选高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株

摘要：

背景与目的 N端截短的羧肽酶E（N-terminal truncated carboxypeptidase E, CPEΔN）是一个新的肿瘤转移相关蛋白。本研究旨在筛选高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株，为完成小鼠活体成像实验创造条件。方法构建CPEΔN的慢病毒表达载体。分别用CPEΔN慢病毒表达载体或对照慢病毒空载体转染H1299细胞，2μg/mL的嘌呤霉素加压筛选。Western blot分析CPEΔN蛋白的表达，荧光素酶报告基因实验分析荧光素酶对底物的分解作用。结果当感染倍数（multiple of infection, MOI）是20时，慢病毒对H1299细胞的转染效率可以达到80%。CPEΔN高表达H1299细胞株（H1299-CPEΔN）和对照慢病毒载体表达H1299细胞株（H1299-control）中CPEΔN蛋白的表达量为4：1。H1299-CPEΔN和H1299-control均能够有效分解荧光素酶底物，可以满足活体成像实验的需求。结论筛选出高表达CPEΔN的H1299肺癌细胞株，为活体成像实验的开展创造了条件，也为进一步解释CPEΔN促进肿瘤转移的分子机制奠定了基础。

关键词：肺肿瘤、羧肽酶E N端截短体、慢病毒载体

分类号：R73;R37

资助基金：国家自然科学基金面上项目81372287;辽宁省科技攻关项目2012225016;沈阳市科技攻关项目No.F12-193-9-15资助hTe study was supported by the grants from National Natural Science Foundation of China81372287;Liaoning Province Science and Technology Key Project2012225016;Shenyang City Science And Technology Key Project No. F12-193-9-15

在线出版日期：2015-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：340-344