10.3779/j.issn.1009-3419.2013.05.02
TIF1γ基因启动子区域突变和甲基化与非小细胞肺癌的关系研究
背景与目的 TIF1γ(transcription intermediary factor 1 gamma)属于转录中介因子1家族的成员,可干扰TGF-β/Smad信号通路,抑制TGF-β介导的信号传导,且TIF1γ在多种肿瘤细胞的表达减弱或缺失表明TIF1γ在癌症的发生发展过程中起到抑癌的作用.本研究旨在探索TIF1γ在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞与组织中的表达差异以确定TIF1γ与肺癌发生关系以及肺癌细胞中TIF1γ表达调控的潜在机制.方法 选取13例NSCLC患者癌组织以及对应的癌旁组织样本,培养正常支气管上皮细胞HBE和NSCLC细胞株:A549和95C.运用Real-time PCR和Western blot检测细胞与组织中TIF1γ基因的表达,并用ImageJ灰度扫描软件计算TIF1γ的相对表达量.通过DNA测序的方法检测TIF1γ基因启动子区域突变情况,并采用Bisulfite-sequencing PCR(BSP)克隆测序方法检测TIF1γ 基因启动子区域甲基化情况.结果 相对于HBE,TIF1γ mRNA和蛋白在A549和95C中明显下调(P＜o.05),13对组织样本中,9个(69.2％)癌旁组织样本里TIF1γ mRNA的表达量高于癌组织样本(P＜0.05).突变检测表明TIF1γ基因启动子区-287-5在细胞株中没有突变发生.经BSP克隆测序方法分析发现在TIF1基因启动子-287-5区域里存在5个可被甲基化的CpG位点(-214、-128、-124、-65和-55).但这些CpG位点的甲基化频率在NSCLC细胞株中相比HBE没有明显差异.结论 TIF1γ在NSCLC的发生中可能起抑癌的作用,TIF1γ基因启动子区域-287-5在正常细胞和NSCLC细胞中都没有发生突变,但在-287-5区域中存在5个可被甲基化的CpG位点.
肺肿瘤、TIF1γ、甲基化、Bisulfite-sequencing PCR
16
R93;R73
国家自然科学基金81171894;教育部"新世纪优秀人才支持计划"NCET-09-0165;江苏省人事厅"333工程"、苏州市癌症分子遗传学重点实验室SZS201209;苏州大学"东吴学者"计划资助
2013-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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